骨折治疗情况怎么写范文优选9篇

骨折治疗情况怎么写范文 第一篇

学校卫生工作的对象是正处在迅速生长发育过程中的青少年一代，而学生是处在长知识、长身体的时期，他们的学习、劳动、体育锻炼、生活等卫生问题都直接关系到他们的生长发育和身心健康，关系到他们成年后的体质，甚至关系到整个民族的兴衰。为了搞好学校卫生工作，根据《学校卫生工作条例》，根据上级下达的任务指标，根据本校的工作指导思想及工作实际，特制订如下计划：

一、 综合管理：期初制订出工作计划及各项制度，划分好各班卫生包干区，要求各班做到一日二小扫(早晨、放晚学后)，一月一大扫，节日突击扫，订出卫生检查评比制度，由各班卫生委员配合校医室做到天天检查、打分，一周小汇总，一月大汇总，并公布卫生检查结果。

二、 做好各班卫生干部的培训：期初召开各班卫生委员会议，重点布置本学期学校卫生工作任务，要求卫生干部在环境卫生、疾病防治、驱虫普治、季节性传染病防治、学生营养等方面，与校医室密切配合，把工作做好，并做好眼保健操培训。

三、 健康体检：于9月底或10月初对全体学生进行一次全面健康体检，体检率达98%以上，对检出阳性体征做好进一步查治工作。

四、 近视眼防治：第3周为“防近宣传周”，通过卫生专栏(印刷)、广播宣传等形式进行防近知识宣传，对视力为—假性近视采用“增视明、珍珠明目液”进行治疗 ，控制近视率上升。

五、 牙病防治：根据市防疫站要求，本学期学生使用保健牙及防龋牙膏，结合“爱牙日”，做好爱牙宣传及正确刷牙方法宣传。

六、 学生营养：人类生命首先在于营养，为了向学生介绍营养知识，及“营养与健康”的关系，于10月份搞一次营养知识专题讲座，一期营养知识专题板报，一节营养知识健康教育课。

七、 传染病防治：通过卫生专栏及广播形式，对学生进行夏秋季传染病、食物中毒以及流行性感冒等防治知识宣传，预防传染病的发生。

八、 健康教育：结合学生爱眼、爱牙、营养、传染病以及学生六病防治工作实际，每学期刊出卫生专栏与广播宣传(3次)，对学生进行健康知识教育。

九、 食品卫生：本学期学生用餐由配餐中心提供，餐具专人专用。

十、 疾病防治：做好学生及教职工常见病的治疗监测工作。

十一、 及时上报各类工作报表，将本学期工作归档于“学校卫生档案”中。

骨折治疗情况怎么写范文 第二篇

分析化学是一门实践性非常强的专业，因此实验在其中占据着重要意义。

教学的开展离不开实验教学，在实验教学中学到更多实践知识，动手能力与实际操作能力也会随之获得提升。而随着科学技术的发展，大量的新型仪器以及检验技术相继出现，医学检验专业对学生动手能力的要求也会越来越高，学生只有同时兼具高实验操作技能、较高的理论水平、独立设计医学实验的能力以及较强的分析问题能力才能成为时代所需要的医学检验人才。由此，在医学检验专业的日常教学活动中，需要重视实验教学、利用实验教学来提升整体教学质量，让医学检验专业的学生在掌握牢固理论知识的同时可以同时获得实践机会，提升实践操作能力。此外，需要注意的是，在教学过程中，教师还需要纠正学生只重视医学部分内容而忽视化学部分内容的不正确思想，全面巩固基础知识，以免由于知识的漏洞而影响到实验教学的效果。

强化医学检验专业分析化学教学效果的措施

1、在教学内容方面，抓住重点，积极进行总结和归纳。

医学检验的学生在学习分析化学之前就已经学习过相关的医用基础化学课程，教师只需要将教学内容梳理一次学生就会明确自己薄弱以及所需要掌握的地方。然后教师可以针对性地对重点内容进行讲解，节省教学时间。分析化学所涉及的内容包括数学统计以及化学等，都属于比较复杂的内容，并且会出现比较多的公式。因此，教师在教学过程中需要善于归纳，将相似内容总结在一起，让学生可以更快记住重点内容。比如在计算弱酸性体系的分布系数时，涉及到的公式比较复杂，教师可以通过其中发掘规律的方式为学生找出便于记忆的方法：公式中的分母是按照氢离子浓度降幂的顺序排列的，分子则取决于型体中所含氢的.个数。抓住这样的规律之后学生就可以更快并且更深刻地记住计算公式。

2、在教学模式方面，多种教学模式相结合，丰富课堂。

在教学模式方面，教师可以在确保教学质量的基础上加强与学生之间的互动。以讲授为主，同时结合谈论、提问、小论文以及习题课等辅助手段让学生的思考成为教学中心，激发学生的创造性思维，让学生感受到学习的乐趣并逐渐取得进步。首先，教师可以从溶液的移取、天平称量的操作方法等入手进行讲授教学，在与实验课结合的基础上培养学生对检测结果精度的重视。其次，在一部分知识结束之后教师可以利用提问教学的方式来强化学生对知识点的记忆，并让学生在抢答过程中获得成就感，激发出他们对分析化学的学习热情。再次，教师可以根据学生的知识掌握情况确定一个课题，让学生围绕该课题展开谈论并相互交流。学生在交流过程中不仅可以看到自己与同学之间的差距更可以明确认识到自己的不足，然后有针对性地进行强化训练。讨论教学的开展同时也可以提高学生在教学过程中的参与度，让学生成为教学主体，在活动过程中发挥主观能动性，更加积极、主动地学习。

骨折治疗情况怎么写范文 第三篇

一、选题的目的和意义

定量结构活性关系(-，简称qsar)是20世纪60年代发展起来的一门新兴学科，是由结构活性关系(structure-，简称sar)发展而来的。qsar是通过对已知结构且有生物活性系列化合物(如一系列有相同药理作用的结构相似的化合物)进行化学信息学的计算，选用适当的数学模型建立活性与化合物结构之间定量关系，解释由于分子结构的变化影响化合物生物活性的改变，推测其可能的作用机理。然后建立有效的qsar模型，如果有新化合物的出现，且其结构数据已知，可以预测其生物活性，也可以优化结构改变现有化合物的结构以提高其生物活性。这种方法广泛应用于药物、农药、化学毒剂等生物活性分子的合理设计。在经历40多年的发展过程中，定量构效活性关系在国际上已成为一个相当活跃的研究领域。

长期以来，肿瘤一直严重威胁着人类的健康与生命。全世界的科学家在过去的几十年中付出了巨大努力，从多个角度来研究肿瘤的致病机制，采用各种手段来进行预防、诊断与治疗，但肿瘤的发病率与致死率仍然居高不下。who文件显示:过去数十年中，全世界每年有近700万人死于恶性肿瘤，估计20_年将升至1000万。对肿瘤的治疗主要包括外科切除、放射治疗和用抗肿瘤药物进行的化学治疗。抗肿瘤药物有[细胞毒xxx和促进分化等作用，可以杀死肿瘤细胞、抑制肿瘤细胞的生长繁殖和促进肿瘤细胞的分化等，从而可以治疗或治愈肿瘤，而且由于其相对低廉的费用，被大多数肿瘤患者所接受。

尽管肿瘤的化学治疗已取得重大进展，新的抗肿瘤药物不断出现，但肿瘤的化学治疗仍存在着许多问题，这主要是因为实体肿瘤占恶性肿瘤的90%但多数实体瘤如肺癌、肝癌、结肠癌及胰腺癌等还缺乏有效的药物;现有的抗肿瘤药物毒副反应太大，缺乏选择性;肿瘤细胞对抗肿瘤药物产生抗药性[1]。

qsar主要侧重于药物早期的研究和发展，为新药物分子的筛选的和设计开拓了新的途径[2]，在受体结构已知的情况下，对抗肿瘤药物进行定量构效活性关系研究，用生成与受体结构互补的配体的方法来发现可以针对特定肿瘤、特定靶点的非细胞毒类药物，使之更具有选择性和针对性。随着新qsar模型的建立，极大地缩短了新药合成的时间，降低了开发成本，并能在某种程度上预测药物对特定肿瘤人群的有效性。为肿瘤治疗起到了积极地推动作用。

二、国内外研究现状

肿瘤的化学治疗药物发展很快，每年都有大量抗肿瘤药物研究文献发表，各国对抗肿瘤药物的开发也予以高度重视和大量投资，美国就此专门成立了美国国立癌症研究(，简称nci)，成为了世界抗肿瘤的权威机构。

国内研发方向主要以含中草药及其活性成分的抗肿瘤药物，可以归纳为以下几个方面:(1)对现有药物进行结构改造以改善其药理学特性，如增加水溶性、降低毒副作用等;(2)以新的作用机理或作用靶点为指导寻找新的活性物质作为先导化合物;(3)发现新的作用靶点。在当前生物学的后基因时代，科学家们要面对数千个潜在的药物靶点，探讨它们与小分了化合物的相互作用;(4)加强定量构效活性构关系研究。

近年来随着分子生物学和计算机技术的迅速发展，使得开发新药的技术路线发生了重大变革。国际上越来越多的研究机构在新抗肿瘤药物的开发中使用计算机辅助分子设计，它大大加快了新药设计的速度，节省了创制新药工作的人力和物力，使药物学家能够以理论作指导，有目的地开发新药。计算机辅助分子设计主要分两种情况:一种是在受体结构已知的情况下，采用生成与受体结构互补的配体的方法来寻找新药物;另一种是在受体结构未知的情况下，采用对一组具有类似活性的化合物建立定量结构活性关系，在此模型基础上进行结构修饰来预测生成新的化合物。

qsar作为抗肿瘤药物设计研究中的一个重要计算方法和常用手段，在新药的开发和研制过程中占据了重要位置。近半个世纪以来，qsar研究对有机合成化学、药物化学及药物设计的发展起了巨大的推动作用，已经成为研究物质理化性质与生物活性以寻求分子解释的一个强有力工具。下面就定量活性结构活性关系研究的一些常见方法作简要地介绍如下。

1、二维定量结构活性关系方法(2d-qsar)传统的二维定量结构活性关系方法很多，有hansch法、基团贡献法和分子连接性指数法等[3]。

其中最为著名、应用最为广泛的是hansch法。它假设同系列化合某些生物活性的变化是和它们某些可测量的物理化学性质(疏水性、电性质和空间立体性质等)的变化相联系的，并假定这些因子是彼此孤立的，采用多重自由能相关法，借助多重线性回归等统计方法就可以得到定量结构活性关系模型。

基团贡献法是free-wilson在对有机物亚结构信息和生物毒性的相关研究基础上建立的一种方法。这种模式认为有机物与受体间的毒性效应是该有机物特定位置上不同取代基团毒性贡献的加和。free-wilson法仅适用于具有相同母体结构的有机物，常被用来对有机物进行毒性初评。

分子连接性指数法(，mci)是由kier和hall提出的。它是根据分子中各个骨架原子排列或相连接的方式来描述分子的结构性质。mci是一种拓扑学参数，有零阶项(0xv)、易阶项(1xv)、二阶项(2xv)等等，可以根据分子的结构式和原子的点价(δ)计算得到，与有机物的毒性数据有较好的相关性。mci能较强地反映分子的立体结构，但反映子电子结构的能力较弱，因此缺乏明确的物理意义，但由于其具有方便、简单且不依赖于实验等优点，近年来得到广泛应用和发展[4-8]。

2、三维定量结构活性关系方法(3d-qsar)随着结构活性关系理论和统计方法的进一步发展，20世纪80年代，三维结构信息被陆续引入到定量结构活性关系研究中，即3d-qsar。与2d-qsar比较，3d-qsar方法在物理化学上的意义更为明确，能间接反映药物分子和靶点之间的非键相互作用特征。因此，近十多年来3d-qsar方法得到了迅速的发展和广泛的应用，研究方法也很多[9]，比如分子形状分(，msa)，距离几何方法(distancegeometry，dg，比较分子力场分析(，fa)，比较分子相似因子分析()以及虚拟受体(phesudoreceptor)等方法。其中应用最为广泛的fa方法。

3、随着技术的发展和生产技术的进步，又出现了一些先进的方法来构建qsar模型，都具有很好的预测能力。其中又以启发发(heuristicmethod，简称hm)，支持向量机(，简称svm)，基因表达式编程(，简称gep)比较常见。支持向量机()是vapnik[10]等人根据统计学理论提出的一种新的通用学习方法，它是建立在统计学理论的vc维理论和结构风险最小原理基础上的，能较好地解决小样本、非线性、高维数等实际问题[11-12]，已成功地应用于分类、函数逼近和时间序列预测等方面[13-15];基因表达式编程(gep)是基于生物学遗传思想，保持了生物学的特性，具有良好的结果重现性，同时也能够进行[遗传变异xxx控制，最终能获得可靠的实验效果。

三、主要研究内容

1、查阅中外文文献选取数据来源。

2、理化参数与结构参数的计算。

3、具体的结构参数的分析。

4、svm与gep的方法研究。

5、定量结构关系式的建立。

6、定量结构关系式的验证。

7、得出结论和总结。

四、论文工作计划

3月中旬-4月初:选题。

4月初-4月底:查阅资料，熟悉实验原理及方法，准备开题报告。

5月10日:开题。

5月初日-5月底日:进行毕业设计实验，记录数据，撰写论文。

6月初日-6月中旬日:进行毕业论文答辩。

五、参考文献

[1]任华益。中华综合临床医学杂志(山东)，20_，7(2):28-33。

[2]徐娟，王林编译。计算机辅助药物设计中的qsar和qsmr研究。国外医学·药学分册，20_，30(3):135-138。

[3]郭宗儒。药物化学总论。北京:中国医药科技出版社，1994。108。

[4]bakulhhrao，shyamr，asolekar。-waterinterface。waterresearch，200l，35(14):3391-3401。

[5]冯长君，堵锡华，唐自强。取代芳烃对发光菌、大型蚤、呆鲦鱼急性毒性的qsar研究。应用化学，20_，19(11):1037-1042。

[6]秦正龙，冯长君。取代苯酚的定量结构-活性p性质相关性研究。有机化学，20_，23(7):654-658。

[7]堵锡华。取代芳香族化合物生物活性的拓扑学。南昌大学学报(理学版)，20_，29(2):155-160。

[8]aleksandarsabljic。。chemosphere，20_，43(3):363-375。

[9]徐筱杰，侯廷军，乔学斌，章威。计算机辅助药物分子设计。北京:化学工业出版社，20_。

[10]vapnikvn。。

ny:springer-verlag，1995。

[11]阎辉，张学工，李衍达。应用svm方法进行沉淀微相识别。物探化探计算技术，20_，(2):158-164。

[12]张学工。关于统计学习理论与支持向量机。自动化学报，20_，(1):32-42。

[13]vapnikv，golowichs，smolaa。，，andsignalprocessing。in:mozerm，jordanm，petscheteds。，mitpress，1997-09。

[14]马云潜，张学工。支持向量机函数拟合在分形插值中的应用。清华大学学报(自然科学版)，20_，(3):76-78。

[15]mullerk-r，smolaaj，ratschg。。in:procoficann97，，1997:999-1005。

骨折治疗情况怎么写范文 第四篇

选题背景和意义

选题背景

几十年来，在计划经济体制下，我国医疗服务属福利化范畴;医疗服务市场化是在宏观的市场化改革推动下进行的。随着医疗体制改革的不断深入，医疗服务具有市场的性质已是不争的事实 。加入WTO以后，医疗市场逐渐开放，民营医院的迅速崛起，中外合资合作医院的建立，医疗市场竞争日趋激烈。

作为省会城市，郑州除了省市各级医疗机构之外，还有很多不同种类的专科医院和专家门诊，近年来，郑州市医疗卫生行业更是进入快速发展阶段，目前医院总数已经达到300余家。

选题意义

现实意义

通过对河南省中医院200名患者服务满意度调查，围绕就医环境、技术水平、服务态度、服务效率、服务收费、医德医风等6方面的分析，客观公正地收集患者及家属对医院各方面的意见和建议，从而为科室考核、医院的管理和发展提供可行的依据。

理论意义

国内外相关研究综述

目前国际上比较流行的是以下三种模型，当然在服务营销领域，这三种理论模型并非全部，其它学者还提出了很多其它的理论模型，但这三种是最具影响和代表意义的，因为这三种模型无一例外地将研究的重点放在面对面的服务体验上。

服务体验及其构成要素

任何服务体验都由四个要素构成：1)服务员工;2)服务设施;3)服务顾客;4)服务过程。尽管各种服务体验都包括这四种要素，但四要素对服务体验的贡献程度却因服务而异。譬如，在一些服务体验中，员工就扮演着不太重要的角色，例如相对于牙医来说，电影院工作人员对观众欣赏影片的影响就很小。

员工既包括那些与顾客直接接触的人(如服务生、出纳等)，也包括那些虽在顾客的视线之外，但同样为服务的提供做出贡献的组织成员(如厨师、银行会计等)。服务设施既包括顾客所能接触到的设施，(如餐厅、银行大厅等)，也包括那些顾客一般很少接近的设施(如饭店的厨房、银行的保险柜等)。顾客是指服务的接受人(如用餐人、存款人等)与那些与其共享服务设施的人。最后，服务过程是指为提供服务而从事的一系列活动(即在用餐或存款时，顾客与服务组织所采取的各种行动)的活动顺序。

服务体验的四个构成要素，皆在服务体验的形成过程中扮演着重要的角色。然而，对不同的服务互动过程而言，并非所有的服务体验构成要素皆对服务体验施加同等重要的影响。为兼容这些特殊情况，任何服务体验分析框架都应允许各构成要素的重要性有所不同。

服务营销组合理论

营销组合，是指组织在识别可控制营销因素的基础上，根据顾客的需求来确立营销因素的最佳组合。早期的营销理论，几乎皆由营销组合概念来驱动。在有关营销组合的诸多观点中，最具影响力的当属 4P's 营销组合，其中的 4P 分别为产品(product)、价格(price)、促销(promotion)与地点(place)。Booms与Bitner(1981)建议，对服务组织来说，应在 4P 的基础上增加另外三种营销因素，即参与者(participants)、有形证据(physical evidence)和服务装配过程(process of service assembly)，故服务营销组合就是在传统的 4P's 营销组合的基础上增加上述3 P's。服务营销组合中所新增加的 3P ，抓住了服务营销的本质，指明了服务产品与有形产品的差别，也为我们提供了 一种剖析服务体验及其构成要素的理论模型。

参与者是指卷入服务产出过程的所有人，不仅包括顾客，而且包括员工。有形证据是指服务环境以及服务的其他有形层面。服务装配过程是指为提供服务而发生的一系列活动及其发生顺序。对任何服务而言，新增加的每一种营销因素都会影响顾客对服务的总体感觉。因此，意欲针对具体细分市场拓展服务业务的组织，可根据目标顾客的特点来调整其中的一种或多种营销因素，以突出服务特色。服务特色可来自于有形证据。同样，一个服务组织也可借助服务参与者的调整来差别化它的服务。与传统的 4P 一样，新加入的 3p 之间也存在多重联系。强化其中的一个营销因素以影响顾客的消费感觉，则可能需要或引发其它营销因素的变化。

总之，服务营销组合模型识别融入3个新的营销因素，而此 3P 对营销一种服务时非常重要。服务营销组合模型的优势之一，是其建立在营销组合这一较为成熟的营销概念之上，既突出了这一理论模型的正统性，又强调了服务营销与有形产品营销的差别之处。

服务剧场模型

把服务比作一场戏剧，服务剧场模型(Grove and Fisk，1983，1992)拥有与舞台产品一样的构成要素：演员、观众、设施、前台、后台与表演。

研究内容、重点和难点

研究的基本思路和框架

本文以河南省中医院服务满意度调查问卷分析出的问题为出发点，运用服务质量差距模型，分析导致提供服务失败最可能出现的5种差距，帮助医院管理者发现服务质量问题的根源，努力消除那些存在的差距，提高医院医疗服务质量。

骨折治疗情况怎么写范文 第五篇

百合知母汤抗抑郁细胞内信号转导通路的机制研究

研究生姓名：xxx

导师姓名、职称：xxxx 教授

学科专业：基础医学院

研究方向：方剂的配伍规律及临床运用

一 研究目的与意义

1.研究目的

百合病最早见于张仲景的《金匮要略》，属中医情志病范畴。《金匮﹒百合狐惑阴属阳毒病证治》篇将“百合病”描述为：“意欲食复不能食，常默然，欲卧不能卧，欲行不行，饮食或有美时，或有不用闻食臭时，如寒无寒，如热无热，口苦，小便赤，诸药不能治，得药则剧吐利，如有神灵者，身形如和，其脉微数。”从百合病的临床表现看，与抑郁症的诊断标准有较多的相似之处。所以现代不少医家都将中医的百合病归属于抑郁症[1,2,3]。百合知母汤为治疗百合病的经典方药之一，由百合和知母两味药组成。百合宁心安神，润肺止咳;知母清热泻火，滋阴润燥。百合甘寒清润而不腻，知母苦寒降火而不燥。百合偏于补，知母偏于泻。二药伍用，一润一清，一补一泻，共奏润肺清热，宁心安神之效。主治阴虚或温热病后余热末清，以致头昏、心烦不安、失眠等症以及情志不遂，以致精神恍惚、不能自制等症。 故本课题旨在通过体动物实验揭示百合知母汤抗抑郁可能的细胞内信号转导机制。

2.研究意义

抑郁症是常见的危害人类身心健康一类精神疾病，以显著而持久的情感或心境低落为主要特征，在WHO的一项流行病学调査中发现全世界约有10%-20%的人一生中曾有过抑郁体验[4]。随着现代社会的生活压力逐渐增高、工作节奏加快，人们处于应激状态中的机会增多，抑郁症的发病率更逐年上升[5,6]，越来越多的患者正遭受抑郁症的折磨，给家庭及社会造成了严重的经济负担。因此，加强抑郁症的防治，寻找安全、有效的治疗方法，具有非常重要的社会和经济意义。

抑郁症发病机制复杂，诱因繁多，针对某一单一环节的药物难以取得满意的疗效，许多抗抑郁西药存在抗抑郁谱窄、起效慢、药价高、依从性差、副作用大及易复发等不足[7]。传统的中医学中蕴含着丰富的心身医学思想，其“形神合一论”，“天人合一论”就包含了广义的心身医学思想。因此国内外越来越重视传统中草药及复方抗抑郁的研究，开展了广泛而深入的实验研究，积累了丰富的经验，且实验研究成果在临床运用中也取得了良好的疗效，为中医学和现代心身医学的融合、发展提供了新的契机。中医心身医学研究工作逐渐起步，心身医学的中医药防治研究工作在病因病机及临床诊断方面也取得一定的进展[8]。

随着分子生物学的发展，抗抑郁药物抗抑郁作用机制已由细胞外单胺递质途径，逐步转向细胞内信号转导机制，而目前针对百合知母汤抗抑郁作用机制的研究大都局限在行为学观测、脑内神经递质和神经内分泌等方面。本研究采用大鼠慢性应激结合孤养抑郁模型，对百合知母汤的抗抑郁作用及其细胞内作用机制进行研究，以期为其进一步的新药开发研究和临床应用提供实验基础。

二 研究现状

1.百合病的研究现状

百合病的起源

百合病始见于张仲景《金匮要略·百合狐惑阴阳毒病证治第三》篇：百合病者，百脉一宗，悉致其病也。意欲食复不能食，常默然，欲卧不能卧，欲行不能行，饮食或有美时，或有不用闻食臭时，如寒无寒，如热无热，口苦，小便赤，诸药不能治，得药则剧吐利，如有神灵者，身形如和，其脉微数。这段文字概括了百合病的主要症状是精神、饮食、睡眠、行为、语言、感觉的失调，与西医学抑郁症的主要症状有颇多相似之处。“百脉一宗者，分之则为百脉，合之则为一宗”因人体百脉同出一源，源病则百脉合病，周身受累，因此而得名百合病。

百合病的病因病机 百合病的病因病机为伤寒热病之后，余热伤阴，或情志不遂，郁热伤阴，导致心肺阴虚内热，百脉失养而成。病机特点是心肺阴虚内热，心神失养，以神志改变为主要临床特点。心肺阴虚，余邪未尽，则出现口苦、小便赤、脉微数。该组症状是百合病的主要客观体征。百脉遍布周身，百脉失和，则行动感觉变异，如“欲卧不能卧，欲行不能行”“意欲食复不能食，饮食或有美时，或有不用闻食嗅时”“如寒无寒，如热无热”等。神志失和，则现“如有神灵者”“常默默”。

百合病的治疗法则

百合病以心肺阴虚为基本病机，以滋养心肺、润燥安神为治疗法则。可“随证治之”分为以下几型：①正治法：“百合病，不经吐、下、发汗，病形如初者，百合地黄汤主之。”百合病未经误治，日虽久而病形如初者，以滋养心肺阴血，清热安神为法，以百合地黄汤主之。取百合润养心肺，清气分虚热，生地滋养心血，清血分虚热，泉水煎药，取清热助阴，血热从小便下行之功。诸药合用，心肺得养，气血同治，阴复热清，百脉和调，病症自除。②误汗后：“百合病发汗后者，百合知母汤主之。” 百合病误用汗法，汗后阴液受伤，心肺阴虚加重，燥热尤甚，除具备百合病的基本症状外，尚可出现津伤燥热的心烦、少寐、口干或渴、午后潮热、小便短少等症候。治宜养阴清热、润澡除烦，用百合知母汤主治。③误下后的滑石代赭汤(百合、滑石、代赭石)。④误吐后的百合鸡子汤(百合、鸡子黄)。⑤久病变渴的外用百合洗方(百合)。如内服外洗仍口渴不解，方用栝蒌牡蛎散(栝蒌根、牡蛎)。⑥久病变发热的百合滑石散(百合、滑石)。

2.抑郁症的研究现状

抑郁症的起源

抑郁症是一种情感性精神障碍，临床上以情绪低落、思维迟缓和精神运动性抑制为特征，其它症状包括丧失自尊、不恰当的内疚感、死亡和自杀念头、注意力集中程度降低以及睡眠和食欲减退，还可能伴有各种躯体症状。

抑郁症是一种最普通的精神疾病。我国对情感性精神障碍进行流行病学调查1985年：终生患病率约为12%。我国对抑郁症的识别率低,临床漏诊率达50-60%。一般内科医生对包括抑郁症在内的心理障碍的识别率只有,约只有1/4的抑郁症病人才能接受正规治疗。有专家认为我国抑郁症的发病率应为10-15%，随着人口的逐步老龄化，抑郁症在60岁以上人群中的发病率将高达 20%～50%。1994年WHO全球调查发现,抑郁症的现症患病率现症患病率为,终生患病率为20-30%。约13 - 20%的人一生中曾有过至少一次抑郁体验。《20xx 年世界卫生报告》指出，抑郁症目前已成为世界第四大疾患，到 20xx 年抑郁症可能成为仅次于心脏病的第二大疾病，抑郁症正在成为一个严重的全球问题[9-13]。

抑郁症的发病

抑郁症的病因十分复杂，一般认为病因可能与遗传、人格特征、心因因素有关。其发病机制也处于假说阶段，主要包括单胺递质学说、神经内分泌学说、信号通路学说[14-15]。

单胺假说作为抑郁症研究的重点认为单胺类神经递质(如5-轻色胺、多巴胺、去甲肾上腺素等)的失衡可导致抑郁的发生。大量研究亦显示抑郁症与遗传、神经、心理等因素诱发的中枢5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺(Norepinephrine,NE)、多巴胺(Dopamine, DA)等单胺类神经递质含量降低及其受体功能下降有关 [16-17]。有研究[18]表明抑郁模型大鼠下丘脑、纹状体、海马内 5-HT、NE及DA 及其代谢产物、合成前体的含量明显降低。这也支持了经典的单胺递质学说。①5-HT：抑郁症的发病机制涉及突触间隙5-HT水平及5-HT受体亚型功能的失调。5-HT功能活动降低,则患者心情抑郁、食欲减退、运动活动减少。Coppent[19]等于1965年首先提出5-HT与抑郁症有关,认为抑郁症是由中枢神经系统5-HT释放减少,突触间隙的含量下降而引起的。近年来,研究发现了很多5-经色胺的受体亚型,使得5-HT递质系统与抑都症发病的关系越来越受到关注。②NE：大量研究证明脑内N E的绝对或相对缺乏会引起情绪低落、心境抑郁。Schildkraut[20]于1965年首先提出抑郁症的发生是由于脑中NE不足所致,中枢神经系统中NE含量不足则发生抑郁症NE的缺乏可能是由于内源性的生成释放异常或由于NE系统慢性刺激所致的继发性粍竭[21]。Bmnello[22]等指出,自从发现一些药物通过改变NE代谢既能导致抑郁症又能缓解抑郁症,NE在抑郁症中所起的作用越来越受到关注。③DA：1975年Randrup首先提出,抑郁症的发病可能与DA有关。后来Maj等研究者证实,几乎所有长期抗抑郁治疗的患者都会增加D A诱导的奖赏反应。1983年Willner等提出抑郁症存在DA功能的降低,尤其是伴随有精神运动迟滞的患者[23]。对抑郁症自杀者尸检结果提示,抑郁症自杀患者尾状核和伏核的DA代谢率降低[24]。

目前,抑郁症的神经内分泌机制研究中,下丘脑一垂体一肾上腺轴(HPA轴)功能亢进是较为公认的发病机制之一。大量研究显示,抑郁症患者的HPA轴功能 亢进,血浆促肾上腺皮质激素释放激素CHR、促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质 醇(CORT)浓度明显升高,而且这种功能亢进是依赖性的,随着抑郁的恢复,HPA轴的功能也逐步恢复正常[25]。Catalan[26]等发现抑郁症患者下丘脑及下丘脑外的促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)浓度都升高,重度抑郁组比轻度与中度抑郁发作CRF血浓度更高,且CRF与皮质醇血浓度显著相关。 在发病机制方面，受体后信号通路及其第二信使系统在该病发病及治疗中的作用是当前研究的热点。以脑内cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein ,CREB )为交汇点的细胞内信号转导通路正受到越来越多的关注，尤其是海马CREB的改变。早在1996 年，Nibuya[27]等就报道抗抑郁治疗，大鼠海马 CA1 区、CA3 区和齿状回均可见CREB mRNA的表达增多。CREB 可能是各种抗抑郁信号转导通路的交汇点。海马CREB的表达和活化受到多种信号分子和信号通路的影响：

①腺苷酸环化酶/环磷酸腺苷/蛋白激酶A通路(AC/cAMP/PKA通路)，是研究最早的抗抑郁通路。其主要过程是：胞外信号激活胞膜上G蛋白耦联受体→AC激活→胞内cAMP升高(降解cAMP的酶主要是磷酸二酯酶)→PKA激活→CREB磷酸化→调节基因转录→生物学效应。Li和Branski[28,29]等实验研究发现海马cAMP通路的激活对改善抑郁症状起积极作用。

②酪氨酸激酶受体B/丝裂原活化蛋白激酶/核糖体 S6激酶通路(TrKB/MAPK/RSK通路)，是一条和细胞生长、增殖、凋亡以及突触可塑性密切相关的信号通路。在各种 MAPK 通路中，细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)信号通路与抑郁症关系最为密切。ERK1/2 通路激活的大致过程是：TrKB 的激活→MAPK激酶激酶(MAPKKK, RAF)的激活→MAPK激酶(MAPKK, MEK)的激活→ERK1/2的激活→RSK的激活→ CREB 磷酸化→调节基因转录→生物学效应。抑郁症患者的尸检报告显示脑内MAPK减少可能是严重抑郁症的病因之一[30]。

③Ca2+/钙调蛋白/钙调蛋白依赖的蛋白激酶通路(Ca2+/CaM/CaMK通路)，通路涉及多种离子通道、受体和酶，其激活的主要过程是：胞浆内钙浓度升高→钙离子与CaM结合→激活CaMK→CREB磷酸化→调节基因转录→生物效应。王庆松等 [31]利用猫对大鼠造成急性捕食应激，发现在捕食应激后大鼠海马细胞内 CaM 信 号通路调控紊乱，表现在细胞内 Ca2+浓度明显升高，Ca2+-CaM 复合体增多，CaMK的表达升高，提示海马该信号转导通路在严重心理应激所致的行为异常中可能有重要意义。

3.百合知母汤的研究现状

百合的研究现状

方中百合为百合科植物百合Lilium brownii F. E. Brown var. colchesteri Wils.、卷丹 Lilium lancifolium Thunb.和细叶百合 Lilium pumilum DC.的肉质鳞茎。味甘，性微寒。入心、肺经。本品气味稍缓，甘中有收，既能清心肺之余热，而敛气养心、安神定魄，用于治疗热性病后、余热末尽所引起的神思恍惚、烦躁失眠、莫名所苦的“百合病”，又能润肺止咳，用于治疗肺燥咳嗽，或肺虚久咳，或阴虚久咳、痰中带血等症。 百合中主要含有酚酸甘油酯、苷类、生物碱及多糖，另外还含有一些磷脂、蛋白质和无机元素。药理研究表明百合具有抗癌、止咳、耐缺氧与抗疲劳、提高机体细胞免疫功能等作用[32-34]。

知母的研究现状

方中知母为百合科植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge.的根茎。味苦、甘，性寒。入肺、胃、肾经。本品质润，苦寒不燥、，沉中有浮，降中有升。上行能清肃肺气，以泻肺火，润肺燥、除烦热、止咳嗽，用于治疗温热病，邪在气分，症见高热、烦躁、口渴、脉洪大者，以及阴虚燥咳，或肺热咳嗽诸症;入于中，善清胃火、除烦渴，用于治疗消渴病之中消诸症;行于下，则能泻相火、滋肾燥，用于治疗阴虚火旺、骨蒸潮热、盗汗等症。

知母主要含有皂苷、黄酮、双苯吡酮、木脂素等成分。现代研究表明，知母具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解热、抗炎、降低转氨酶等多种药理活性[35-37]。

百合知母汤的研究现状

百合知母汤有养阴清热、除烦润燥之效，以润养心肺为大法，治疗百合病误汗后，津液受伤，虚热较甚者。临床上运用百合知母汤治疗乳腺增生病[38-39]、长期低热[40]、消渴、喘证、盗汗、胃脘痛[41]、失眠[42]、抑郁[43]等症。

三 研究思路与立题依据

1.研究思路 百合知母汤是《金匮要略》中治疗百合病的经典方剂。百合病的描述“百合病者，百脉一宗，悉致其病也，欲卧不能卧，欲行不能行……意欲食复不能食，常默默，如有神灵者……”主要归纳为情绪障碍、躯体不适，与现代医学抑郁症的诊断标准有很大的相似性，因此一般将百合病归属于抑郁症范畴。百合知母汤中的部分有效成分能通过提高抑郁症大鼠大脑皮层单胺递质、抑制HPA轴亢进、提高模型动物脑组织BDNF含量等途径发挥抗抑郁效应。

CREB 可能是各种抗抑郁信号转导通路的交汇点。抗抑郁药物(包括中药)或其它治疗措施可通过调节一种或几种通路，最终激活CREB，调节 BDNF 等基因表达，影响神经元增殖、分化、成熟等可塑性改变，发挥抗抑郁作用。参与调节CREB的各调节因子之间、通路之间存在复杂的交叉联系和相互作用，共同维持着CREB活性的平衡。近年来研究提示：抑郁模型小鼠，存在神经元蛋白和营养因子在海马的表达异常，而这些变化可以被一些中药逆转[44]。当前致力于阐明信号通路、CREB、营养因子、神经再生之间是如何相互联系的，以及细胞靶点、分子应答、行为反应的调节与抗抑郁之间错综复杂的关系。这将有助于我们以CREB为中心了解抑郁症的病理生理机制，并在此基础上研发出疗效可靠、起效迅速、副作用小、经济实用的新药，尤其是帮助我们更好地认识一些中药抗抑郁的可能机制，更充分地利用祖国宝贵的中医药资源。

细胞内信号转导通路是目前抗抑郁机制研究的重点和热点。可被多种不同的信号路径激活。环磷酸腺苷(cAMP)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、钙调蛋白激酶(CaMK)等3条通路是目前认为与抗抑郁相关、最主要的信号通路，这3个主要上游通路最终都使CREB磷酸化，进而调节其下游通路的基因表达，完成神经元生化功能，而CREB是上述3种通路的交汇点。

前期的研究证实：百合知母汤抗抑郁的机制与提高慢性不可预见性应激结合孤养抑郁(CUMS)模型大鼠海马组织5-HT含量、提高脑组织中CREB(cAMP反应元件结合蛋白)mRNA的表达有关(见)。有鉴于此，我们提出假设：百合知母汤抗抑郁的信号机制可能与以上三种细胞内通路有关，三个通路在抗抑郁机制中可能会有所偏重。

围绕假设，基于CREB磷酸化通路，本课题拟将百合知母汤作用于CUMS大鼠，运用ELISA、RT-PCR、免疫组化、Western 印记等方法，检测大脑组织cAMP信号中cAMP和PKA、MAPK信号中TrKB和BDNF、CaMK信号中钙调蛋白(CaM)和CaMK等关键因子，初步探讨百合知母汤抗抑郁的信号机制,筛选出该方抗抑郁的基因靶点。

2.立题依据

中药复方具有成分多、作用环节多、靶点多的特点，多环节之间具有协同效应。因此研究中药及其方剂的抗抑郁作用具有极大的挖掘潜力，而且对解决日益增加的抑郁患者的痛苦有重大的社会意义[45-46]。

四 研究内容及目标

1.建立慢性不可预见性应激结合孤养大鼠抑郁(CUMS)模型;

2.通过检测用药前后模型动物大鼠海马组织环磷酸腺苷(cAMP)和蛋白激酶A(PKA)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症cAMP信号的干预作用;

3.通过检测用药前后模型动物大鼠络氨酸激酶受体B(TrKB)和脑源性神经营养因子(BDNF)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症MAPK信号的干预作用;

4.通过检测用药前后模型动物大鼠海马组织中钙调蛋白(CaM)和钙调蛋白激酶(CaMK)含量变化，评价百合知母汤对抑郁症CaMK信号的干预作用;

五 拟解决的关键问题

通过检测cAMP、MAPK、CaMK三条信号转导路径上重要调节因子cAMP、PKA、TrKB、BDNF、CaM、CaMK用药前后的变化，初步评估百合知母汤对以上三个信号转导路径的干预作用，评价方剂抗抑郁的机制，以便进一步筛选出方剂抗抑郁靶点。

六 实验研究方案

1.实验动物 SD雄性大鼠，7—12周龄，体重180—200g 2.药物制备

按照《金匮要略》中记载的方法：百合七枚(劈)(约20g)，知母三两(切)(约10g)即百合：知母=2:1。取百合100g，知母50g，先以清水将百合浸泡12小时，当白沫出，去其水，再加清水20xxml，武火煎开后改为文火，得百合煎煮液1000ml;再用清水20xxml，先武火后文火，得知母煎煮液1000ml;将2次煎煮液混合，文火浓缩得煎煮液1500ml。按照比例配制足够数量百合知母汤煎煮液，放入冰箱-20℃储存备用。临用时取出，浓缩至合适体积。为确保实验结果的可比性，所有实验都用同一批药材。所有药物的给药剂量根据“人和动物体表面积折算的等效剂量比率表”计算而来：大鼠(200g)用药量=人(70kg)日用剂量。每只大鼠的给药体积为1ml/100g。

百合知母汤终浓度为(成人日用量30g)

氟西汀终浓度为(成人日用量20mg)

各组按浓度给药28天，对照组给等体积的三蒸水。

抑郁症模型大鼠制备

除正常对照组外，其余动物采用慢性轻度不可预见性温和刺激结合孤养(CUMS)的造模方法：各造模组大鼠均单笼饲养，刺激因子包括禁食、禁水、4℃冰水游泳、夹尾、晃尾、潮湿垫料和倾斜45°、束缚应激、陌生物品、空笼刺激、噪音刺激、闪光刺激、水平震荡、昼夜颠倒等。每日随机给予2到3种刺激，使大鼠不能预料刺激的发生以避免产生适应。每种刺激交叉累计使用2-3次，持续21天，造模成功后，给药期间继续维持造模。建立慢性温和不可预见性应激结合孤养(CUMS)抑郁症大鼠模型,具体操作方法如下：

(1)禁水：即24小时不予供水。具体方法为,造模当天,上午8:00始,撤出大鼠笼内供水瓶,禁水24小时后,于次日上午8:00正常供水。

(2)禁食：即24小时禁止进食。具体方法为,造模当天上午8:00始,清除鼠笼内所有鼠粮,剥夺进食24小时后,禁食期间供水正常。禁食后给少量碎食,然后正常词养.

(3)昼夜颠倒：造模当天,上午8:00,将正常对照组大鼠转移至其它SPF级实验室后,关闭本实验室所有电源,模仿黑夜,至20:00准时打开实验室电源,模仿白昼,给大鼠制造昼夜颠倒的假象。

(4)夹尾：用缠裹有胶布的塑料夹,夹持鼠尾根部,时长为5min。

(5)晃尾：提住大鼠尾巴中部以每秒钟1次的频率,晃尾15分钟,晃尾时力度要轻柔,避免牵拉大鼠尾尖部位,以防脱皮

(6)冰水游泳：取一直径为30cm玻璃缸,注入适量清水后加入适量冰块,调整水温至4℃(根据天气情况,适当调整,以防冻伤),同时调整水液平面据器皿边缘约15-20cm,然后将大鼠放入冰水中,强迫其游泳5min。5min后将大鼠榜出,先用干毛巾擦拭动物毛发,然后用吹风机吹干,避免感冒。每次冰水游泳结束后需捞干净游泳器皿内大鼠类便,避免对下一只鼠产生影响。

(7)高速水平震荡：将动物放入空的鼠笼中，进行人工振荡，2 次/秒，有效节奏连续持续 5min;或者水平晃动，1次/秒，持续30分钟

(8)噪音刺激：90分贝噪音刺激2h，尽量选在白天大鼠休息的时候给予此种刺激。

(9)束缚刺激：将大鼠束缚于500ml烧杯中2h，注意保持通气。

(10)潮湿环境：将大鼠的垫料换以潮湿垫料，持续刺激12h。

(11)异物刺激：往大鼠笼内放置金属条棒，钝性玻璃器皿的异物予以刺激，持续2h。

(12)空 笼：撤掉大鼠笼里面的垫料笼子里不放置任何物品，持续12h。

(13)倾斜刺激,：该刺激因素通常在禁水后进行,应激动物本身饥渴,在倾斜的鼠笼中觅食觅水更为困难。

(14)闪光刺激：LED频闪灯，频闪频率2次/s，持续刺激2h。

以上各种刺激的实施顺序遵循由弱(轻刺激,如昼夜颠倒、禁水禁食、潮湿环境)到强(重刺激,如冰水游泳,夹尾，晃尾，束缚刺激，噪音，闪光等刺激)的原则,以避免刺激之间的交互作用。每日采用1种刺激,平均每种刺激被采用2—3次,同种刺激不能连续出现,使动物不能预料刺激的发生。

4.行为学指标的测量

主要包括 1%蔗糖水消耗率、体重变化率、敞箱实验、Morris 水迷宫实验

体重变化率

分别在实验的第 1d、15d、22d、29、36d 、43d、50d、57、64d进行。动物体重变化率(%)=(当日测量的体重-第1天的体重)/第1天的体重。 糖水消耗实验

实验前期准备，在安静的环境内训练动物适应含糖饮水：第一个24h，每笼同时放置两个完全相同的动物水瓶，两瓶均为同等重量的1%蔗糖水;第二个24 h， 一瓶为1%鹿糖水,一瓶为相同重量的纯净水。然后进入实验阶段，禁水禁食24h后,测定 10小时内大鼠1%蔗糖水摄入量。糖水偏爱率% =糖水消耗量/(糖水消耗量+清水消耗量)X100%。适养期间进行三次糖水偏爱筛选,将糖水偏爱率异常的大鼠剔除,不用于正式实验(三次糖水偏爱测试中均只喝自来水的大鼠为异常大鼠)。测定动物在实验第1天、第22天、第49天、第64天糖水偏爱率的变化。

敞箱实验

敞箱实验(Open-field Test )是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在陌生环境中某些行为的发生频率和持续时间来反应实验动物的自主行为与探究行为,以尿便次数反应其紧张度。敞箱实验(Open-field Test):木质敞箱,立方形,长、宽、高为80cm x 80cm x 40cm,内侧壁、底面为黑色,底面用白线划分为面积相等的25块正方形。室内安静环境下将大鼠放置于敞箱底面的中心方格内,人距离敞箱1米之外,记录大鼠在3 min内活动频率。以穿越底面正方形块数为水平穿越格数(4爪均进入方格才记数,为水平运动得分)、以两后肢直立的次数为竖立活动次数(两前爪腾空或攀附墙壁,为垂直运动得分),理毛次数以及大小便次数。每只动物只测1次,测定完毕后彻底清洁敞箱再进行下一只观察。分别于实验前1天、实验第22天和最后1天进行。

Morris 水迷宫实验

该实验是对大鼠学习记忆能力的检测，主要包括定位航行实验和空间搜索实验。实验用主要装置包括一个银灰色圆形水池(直径 150cm)，一个白色平台(直径10cm)，一台跟踪摄像机以及与摄像机相连的计算机，池内盛水，且水温保持在 22-24℃。最后一次敞箱实验结束后第二天开始，首先训练大鼠寻找平台，平台置于水面下 2cm，摄像机位于水池上方约 200cm，能清晰摄取到大鼠的运动轨迹。将水池分为四个象限，将大鼠从任意一个象限放入水中，记录其找到平台的路径及时间，前几次训练中，若时间超过 120s，则引导动物到平台，并在平台上停留10s。然后进行定位航行与空间搜索实验。定位航行实验：训练结束后的第一天，保持平台位置不动，将大鼠随机从一个象限放入水中，开始记录大鼠的运动轨迹及找到平台的时间;空间搜索实验：定位航行实验结束后，将平台撤走，将动物从原平台位置的对侧放入，开始记录 120s 内大鼠的运动轨迹及潜伏期与穿越平台次数。以此做为对空间记忆能力的检测指标。

悬尾实验

将实验动物通过固定动物尾端2cm处使其头向下悬挂，动物在该环境中拼命挣扎试图逃跑又无法逃脱，从而提供了一个无可回避的压迫环境，一段时间的实验后，记录处于该环境的动物产生绝望的不动状态的时间。动物表现出的这种典型的“不动状态”，反映了一种被称之为“行为绝望状态”，这种行为绝望模型与抑郁症类似，而且对绝大多数抗抑郁药物敏感，而且其药效与临床药效显著相关。

5.尼氏染色

正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏小体，它们主要分布于神经细胞的浆中，形状有大有小，如三角形，有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色，这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)、亚甲蓝(methylene blue)、甲苯胺蓝(toluidine blue)、硫董(thionin)等将其染为蓝色。但是，当神经细胞受伤后，胞质内的尼氏体更可发生变化，严重的可消失，通过观察尼氏小体的数量可以探知神经元的受损或修复情况。

各组大鼠分别于末次给药后麻醉,使大鼠仰卧位固定于实验台上,打开腹腔,掀起右肺,在靠近脊柱处找出下腔静脉和腹主动脉。用止血钳夹住腹主动脉和下腔静脉,接着打开胸腔,用针头经左心室插入升主动脉,后剪开右心耳,进行灌注。先用的生理盐水250ml经心脏快速灌注冲洗,再用4%的低聚甲醛,的磷酸缓冲液()350ml灌注。在灌注固定液过程中后期大鼠颈部、肩部和双前肢逐渐变硬。灌注后取大鼠全脑,10%低聚甲醛固定48-60h。以松果体为标志物,向头侧横向切取3段,每段厚2mm。石蜡包埋,连续切片,片厚lOpin,切片,用于尼氏染色及后期的免疫组化。

将脑片置于甲苯胺蓝(母液：甲苯胺蓝1g，无水乙醇100ml。使用时按1:1比例与新鲜的溶液混合成工作液)或焦油紫(焦油紫;蒸馏水99ml;1%冰醋酸1ml)中室温下染色30min。在75%、95%、100%酒精中各脱色1min，二甲苯透明10min，中性树胶封片。显微镜下观察照相并对尼氏染色阳性神经元进行计数。

6.测量生化指标

主要包括CREB、BDNF mRNA在大鼠海马内的表达;免疫组化检测TrKB、ERK1/2蛋白的表达;免疫印迹法检查CaM、CaMKⅡ的表达。

逆转录-聚合酶链式反应法检测CREB、BDNFmRNA在大鼠海马内的表达 首先匀浆：海马新鲜组织约100mg,加入1ml的TRIZOL试剂,用电动勾浆器进行勾浆;两相分离:分装后样品于15到30℃孵育5分钟。每1ml的TRIZOL试剂勾浆的样品中加入 ml的氯仿,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15-30℃孵育2到3分钟。4℃下120xx g离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色紛氯仿相,中间层核上层的无色的水相。RNA全部被分配于水相中,水相的体积大约是勾浆时加入的TRIZO试剂的60%;RNA沉淀:将水相转移到新离心管中。水相与异丙醇混合以沉淀其中的RNA,加入异丙醇的量为每个样品匀浆时加入，1mlTRIZOL试剂加 ml的异丙醇，混勾后15-30℃孵育10分钟后,于4℃ 12,000g离心10分钟;RNA清洗:移去上清液,每1mlTRIZOL试剂匀浆的样品中加入至少1ml的75%乙醇,清洗RNA沉淀。振荡后,4℃，7500g离心5分钟;重新溶解RNA況淀:去除乙醇溶液,空气中干燥RNA沉淀5-10分钟,切勿真空离心干燥，注意RNA沉淀不要完全干燥,否则将大大降低RNA的可溶性，部分溶解的RNA样品A260/280比值将小于;溶解RNA时,先加入无RNA酶的水用枪反复吹打几次,然后55-60℃孵育10分钟。莰得的RNA溶液保存于-70℃;浓度测定:取少量液体用TE稀释(一般1: 100稀释)后,读取其在紫外分光光度计260nm和280nm处的吸收值,A260下读值为1表示40ugRNA/ml;样品RNA浓度(ug/ml)=A260×稀释倍数40ug/ml;RNA纯度检测:RNA溶液的A260/A280的比值范围应在之间;

在无核酸酶的离心管中配制反应液： RNA，1-5μg;逆转录引物 (20um)，1μl;RNase free H2O，使总体系为μl(反应液配制在冰上进行)。轻轻混匀,65℃变性10min，立即置于冰上2min后加入：RNA-primer mix，μl;5×RTReaction Buffer ，4μl;dNTP(10mM)，2μl;RiboLock RNase Inhibitor ，μl;RevertAid Reverse Transcriptase，1μl。总体系20μl，25℃孵育10min后42℃孵育60min，70℃ 加热灭活10 min，-20℃保存。 设计相应的引物，配制成合适浓度工作液，Real time-PCR仪反应体系液配制：2X all-in-OneTM qPCR Mix(含ROX)，10μl;引物(10pmol/μl)，上下游各μl;ddH2O，μl;cDNA(适度稀释) ，5μl。总体系20μl。反应条件：95℃，10min,以下反复40个循环;95℃,10s;60℃，20s;72℃，20s。最后结果采用2-ΔΔCT法进行测量。

免疫组化法检测TrKB、ERK1/2的表达

切片后,常规脱蜡至水;3%过氧化氢孵育lOmin,可以灭活内源性酶的活性,蒸水冲洗,5minx3次;微波热修复3min,PBS冲洗,5minx3次;滴加5%BSA封闭液,室温孵育30min;滴加一抗,5-HTiaR 一抗稀释为1:50,PKA稀释为1:100,CREB稀释为1:100,4°C过夜,PBS冲洗,5minx3次;滴加二抗生物素标记的羊抗兔IgG,37°C孵育30min,PBS冲洗,5minx3次;滴加三抗试剂SABC,37°C孵育30min,PBS冲洗,5minx3次;DAB显色剂显色,室温下15inin,蒸馈水冲洗,脱水,透明,封片最后DAB 显色剂显色，室温下20min，蒸馏水终止反应，常规脱水、透明、封片，显微镜下观察。每只动物取相同部位的3张切片，每张切片选取3个视野，在同一放大倍数、同一光强度下，采用CMLAS 彩色病理图像分析系统，分别计算每张切片中海马组织TrKB、ERK1/2表达的平均光密度。

免疫印迹法测定钙调素(CaM)、钙调蛋白激酶(CaMKⅡ)蛋白表达变化

取新鲜海马约100mg置管中，生理盐水冲洗两遍，充分剪碎，离心去上清。每管加4℃裂解液1ml，继续剪碎、混匀，低温超声匀浆;14000转离心，5min，取上清备用。取上清5μl，加考马斯亮蓝3μl，去离子水95μl，595nm 处，1cm光径，蒸馏水调零，测各管OD值;根据样品OD值调整蛋白浓度。样品煮沸5min，冷却后取50μg上样;电件(12%浓缩胶：90v30min;10%分离胶：120v120min);NC膜转印(70v120min);5%脱脂奶粉TBST溶液封闭抗体，摇床2h，TBS漂洗5min，3次。一抗孵育(兔抗人CaM、CaMKⅡ多克隆抗体1:500稀释)，4℃过夜;二抗孵育(辣根酶标记羊抗兔IgG 1:1500稀释)，37℃ 1h;扫描并分析结果，条件设置为曝光2min，CCD自动获取图像，同时以1:1000稀释的小鼠抗大鼠beta-actin单克隆抗体作为内参照，各蛋白相对表达量以相应蛋白/beta-actin灰度值表示。

七 课题创新性

1. 本课题首次系统地由宏观到微观地进行综合研究，能从行为学水平→细胞形态水平→分子水平三个层次经行分析，以期待比较完善地探索百合知母汤抗抑郁功效及其机理。

2. 本课题选用了先进的指标，并且采用蛋白水平和mRNA水平检测方法，检测神经营养因子及相关细胞内信号转导通路中关键因子的变化，以期探寻本方提高抑郁症大鼠脑组织CREBmRNA的表达水平的进一步信号转导机制。

八 预期结果

1. 成功完成大鼠抑郁症CUMS模型的建立，构建良好的实验平台。

2. 探讨百合知母汤抗抑郁机制中三种信号转导系统发挥的作用，筛选百合知母汤抗抑郁的靶点通路。

3. 预计在国内学术期刊上发表论文2篇。

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骨折治疗情况怎么写范文 第六篇

你这个情况说明不需要很复杂，公司是要求你将受伤的时间和责任等问题留下书面证据，防止今后的法律问题争议而已，因此，只要能够准确说明就好。言简意赅，说明你具备准确清晰的表达能力；啰里啰嗦凑字数，反而让人觉得你这么简单的事儿都说不明白，倒对你印象不好。建议你参照如下这样写吧：

情 况 说 明

本人***，身份证号：******************，于****年**月**日起到****公司实习。本人左（右）眼于****年**月**日因****不慎受伤，受伤发生在到****公司开始实习工作之前，与公司和当前本人工作无关，不属于工伤范围。根据本人个人意愿，拟在20_年下半年秋季安排对眼伤进行手术治疗，治疗及恢复大约需要3个月左右。手术治疗及恢复期间，因个人因素向公司请假，不需要公司支付请假期间的工资。

特此说明。

说明人：（签名）

****年**月**日

骨折治疗情况怎么写范文 第七篇

儿园卫生保健工作是幼儿园工作的重要组成部分，《幼儿园指导纲要》中明确指出:“幼儿园是实施保育和教育的机构，要实施保育和教育相结合的原则”。为幼儿提供身心健康发展的良好环境，培养幼儿保持和增进自身健康的能力，使幼儿健康成长，是幼儿园保健工作的重点。为了能使在园幼儿得到营养中的保育、环境中的保育、安全中的保育以及科学中的保育，以便幼儿园卫生保健工作更加系统

化、科学化、规范化、现将本年度卫生保健工作计划如下：

(一)保健工作：

1、做好儿童保健各项工作，第一学期末测量身高、体重，中大班测视力，第二学期末对全园幼儿全面体检，并做好评价、汇总、登记、统计，掌握全园幼儿生长发育动态及健康状况，对体弱多病的幼儿采取有效措施，使其逐步达到正常标准。

3、协助妇保所、防疫站做好幼儿预防接种及幼儿保健等工作。

4、协助班级老师做好幼儿日常卫生行为习惯的培养。

5、每月组织保育员培训，不断提高保育员的理论和实践操作能力。

(二)安全保护工作:

1、努力做好安全保护工作，严格执行园门开关制度和幼儿接送制度，防止意外事故的发生，开设安全知识专题讲座，针对一些常见问题向幼儿介绍自我保护的方法，提高幼儿自我保护能力。幼儿园卫生保健工作计划2、杜绝缝针、骨折、烫伤、走失等事故的发生，确保幼儿的身体健康和生命安全。如发生小伤小病及时进行简单处

理：如清洗伤口，涂上药水等，情况严重的进行简单处理后及时送至医院治疗，有外伤事故实事求是做好记录。

3、保健室药品标签清楚，消毒药品保管好，防止用错药。

4、密切与当地卫生组织联系，及时做好计划免疫和常见病防治工作，在疾病高发期要做好加强消毒(紫外灯消毒、服板蓝根等)

5、妥善保管理医疗器具和日常药品。

(三)卫生消毒和健康检查：

1、严格把好体检关，做到新入园的教职员工和幼儿的进行体检。

2、严格把好晨检关，做到“一摸二看三问检查”，摸摸有无发烧，看看精神状态，面色、皮肤有无皮疹，可疑者及时隔离;问问饮食、睡眠、大小便情况，检查有无携带不安全物品，在常见病、传染病多发的秋、春季特别注意幼儿身上、耳后有无异常情况，发现后及时处理。(规定每日晨检重点：星期一：重点检查指甲清洁及手心情况。星期二：重点检查幼儿书包等携带物情况。星期三：重点检查幼儿眼睛及服装整洁情况。星期四：重点检查幼儿口腔、咽部及颌下淋巴结情况。星期五：重点检查耳廓、耳后清洁情况。)

3幼儿出勤情况，督促教师使用好点名册，做好出勤人数登记，对于缺勤者，查明原因，做好记录。两天未来园者，督促教师进行电话联系或家访;对于一周未来园者，通知园长，做好处理。

4、建立健全室内外环境清洁制度，每天一小扫，每周一

大扫，定期检查和不定期检抽查相结合，检查结果及时

反馈。

5、幼儿饭前便后用肥皂流水洗手，培养幼儿良好的卫生习惯。

6、做好日常消毒工作，茶杯、毛巾、餐具按常规及时清洗、消毒，季节交替时期，流行病期间做好加强性消毒，请保育员对紫外线灯定期进行擦灰清理。

7、注意幼儿的五官保健，培养幼儿良好用眼习惯。

(四)营养膳食:

1、每周制定合适幼儿年龄的带量食谱，搭配合理，做好营养分析，注意看看营养搭配是否合理。

2、幼儿园炊事员有一定烹饪技术及卫生营养知识，能为幼儿烹饪出色、香、味美的食品，并注意保存营养素。

3、遵守开饭时间，不宜提早或推迟，做好餐前准备，餐后管理工作，分餐时要洗手，分发干菜、干点不直接用手接触。

(五)、卫生习惯

1、为幼儿准备清洁卫生，安全符合幼儿特点的盥洗室 和入厕设备，进食和入厕后必须用肥皂洗手。特别是小班幼儿，教师要及时教会幼儿洗手的方法，以便养成良好的卫生习惯。

2、将幼儿每天所需餐巾摆放在固定的地方，方便幼儿 取用，并及时做好消毒工作。

3、各班加强餐前擦桌子的消毒工作，正确使用消毒液。

4、培养幼儿洗完手后要做双手合起来的动作，保持双手干净的好习惯，加强午餐习惯培养，教育幼儿不能挑食，确保营养的合理吸收。

5、组织好幼儿午餐，就餐秩序好、安静，在规定的时间 内吃完。

6、饭后组织幼儿散步，遵守幼儿午睡作息时间。

7、掌握好幼儿看电视的时间，组织幼儿看电视注意 坐姿与距离。

(六)保健台帐信息化管理：

1、完善保健各种台帐簿卡，注意平时的积累，及时填写，在晨检时发现病儿与班上老师配合，注意观察，及时给予按剂量服药，测量体温等。

2、统计及时，该公布的及时公布，发现存在问题及时上报或和班上老师商量。

3、对体检中发现的体弱儿、眼病等患儿特别注意，关心，及时将观察了解到的情况记录下来。

(七)、家长工作

1、每月向老师和家长开展宣传卫生保健专栏。

2、建立家园联系，利用各种方式与家长保持联系，了解幼儿在家情况，也使家长及时了解幼儿在家的健康情况，更好为幼儿健康服务。

附：每月工作重点

二、三月份

1、学习本学期卫生保健工作计划，完善各种职责和制度。

2、配备本学期卫生、保健、教学等用品，并发放到各班各部门。

3、完成视力检查并做好登记及矫治

4、全面对园舍设备进行检修。

四月份

1、做好春季流行病的预防工作，对各活动室进行消毒及加强晨检喷液工作。

2、做好全园幼儿的血色素检查和尿常规检查。

3、进行一次全园的卫生大检查。

五月份

1、配合做好家长开放日工作，开展多种宣教形式。

2、及时幼儿膳食调查，并进行科学合理的分析评价。 六月份

1、做好六一体检工作，体检率达95%以上。

2、做好夏季卫生保健的宣传和预防工作，加强安全教育。

3、同时做好防暑降温工作。

4、做好总结

骨折治疗情况怎么写范文 第八篇

一、把好本学期新入园幼儿的体检关

对于新入园幼儿，每个幼儿必须持有体检表及预防接种卡，并且体检合格后才准入园。本学期中要完成市领期十月份的检查工作，以及11月份的在园幼儿的“龋齿”检查工作

二、做好晨检工作

1、做好五大官的检查（包括皮肤、眼神）。

2、询问幼儿在家吃饭情况、睡眠、大小便有无异常。

3、查幼儿是否携带不安全物品来园

4、做好药物登记，了解班里传染病情况。按时发药、喂药，并做好幼儿的全天观察记录。

三、做好秋冬季节常见病、多发病的预防工作

做好秋季的消杀、灭蚊工作，消灭传染病的传染源、切断传播途径，杜绝秋季传染病在园内的发生。

四、开展幼儿心理健康教育，提高幼儿心理素质

开展幼儿安全教育，提高幼儿的安全意识，开学检查大型玩具和各类有隐患的积木。安排科学、合理的一日生活、活动常规并执行。

五、合理安排饮食

1、每周合理制定菜谱，必须每两周有新花样。

2、和食堂人员也要经常讨论，研究出符合幼儿需要的菜谱。实行花样化、多样化，稀稠答配，根据季节、气候特点对食谱进行科学、合理的调整，

3、做好膳管会记录，平时把反馈的情况传给家长，提高菜谱的质量。

4、进餐过程的气氛应是轻松、愉快，而不是令人紧张、压抑的。

5、纠正幼儿偏食、挑食、边吃边玩等问题，要注重以饱为先的正面教育。

六、卫生安全

在卫生保洁方面，从幼儿园厨房到熟食间、寝室、活动室、户外场地、种植地、大厅等每一角落，我们都要制定了严格的清洁制度和消毒制度，并在日常工作中落实到处。工作中我们要求厨房内炊事员加强自身卫生，保育员做到每天的清洁工作。幼儿园的房舍、设备、大型器械等隐患处，发现及时上报，并做记录和处理。

各班级的卫生，我们都落实到每位教师、保育员肩上，做到了一星期大扫除一次，每天小扫一次、消毒一次，保证了教室光线充足、空气清新；认真贯彻、落实每周二小检、每月一大检的卫生检查制度。同时加强对常见病的预防工作，加大力度切断一切传染源，杜绝传染病的传入与流行。杜绝一切卫生死角，做好教室内每天的通风工作，使幼儿有一个干净、明朗、清爽的生活环境。

七、对保育员进行定期的业务培训、学习，实行踏实务劳的工作作风，不断提高保育员的业务知识，提高服务质量，使全园同心协力把工作做得更好。

附：每月工作重点：

九月：

1、认真做好全园卫生、消毒工作，迎接幼儿入园

2、开展“国旗下的讲话”《保健老师的一节课》

3、加强晨检、消毒预防传染病

4、为全园幼儿测身高、体重

十月：

1、整理幼儿健康档案

2、召开膳食管理会

3、迎接县妇幼保健院的检查

十一月：

1、做好幼儿疾病的统计和矫治工作

2、配合县妇幼保健院做好“龋齿”工作

3、召开膳食管理会

骨折治疗情况怎么写范文 第九篇

论文题目：

探讨治疗四肢长骨骨折不愈合的手术改进方法。

一、选题依据、目的和意义

骨折不愈合是骨科临床常见病症，其中以四肢长骨多发，例如胫骨，股骨，肱骨等，针对四肢长骨骨折不愈合二次手术我院多才用植骨术配合LCP重新内固定。自体髂骨作为植骨材料具有较多的优点：如取材简单、组织相容性好、无移植排斥反应、骨诱导作用强等，这些优点使得髂骨成为一种最佳的植骨供材，这在临床上已形成共识。植骨是治疗骨折不愈合的重要方法，其机制是爬行替代所引起的支架作用与供给矿物质的作用，爬行替代顺利进行的条件要求准确的复位、充分的植骨和坚强的固定。为达到充分的植骨，及早促进骨折愈合，我们采用髓内外36°植骨的方法，外用钢丝环扎，配合LCP坚强内固定，术后3~1个月内进行随访，根据愈合情况和功能恢复情况分析手术的临床疗效。选题目地在于探讨治疗四肢长骨骨折不愈合的手术改进方法和疗效，为临床治疗提供参考。

本课题以导师多年的临床资料为依据，通过对骨折不愈合手术治疗的国内外文献进行系统整理，结合山东中医药大学附属医院骨科病房对四肢长骨骨折不愈合患者的随访调查及回顾性分析，根据骨科特殊生物力学特点和导师治疗骨折不愈合的多年临床体会，分析治疗效果，并对手术中的细节问题做初步探讨与论述。同时也希望可以通过对导师的临床实践的研究、总结，能为今后的临床工作提供一些帮助和指导。

二、本课题目前国内外研究的动态、水平

治疗骨折不愈合，可分为手术治疗和非手术治疗，其中手术治疗最重要的就是植骨术加更改断端内固定。骨折不愈合应用自体骨移植治疗效果显着，已经形成共识。植骨是治疗骨不连的重要方法，植骨方式临床多采用髓内外联合植骨。沿肌间隙进入，骨膜下小心剥离显露骨折部位，取出内固定器械，清除骨断端间瘢痕，咬除硬化骨，打通髓腔，修整骨折端，手法复位，按照骨缺损情况取骨。髓内植骨以比髓腔稍粗的骨棒，贴紧髓腔骨质。髓外上盖植骨宜用螺丝钉固定植骨块。骨碎屑充分填充残余的空隙，这样才能确实达到植骨的目的和要求。自体皮—松质骨植骨的爬行替代缩短了骨折愈合过程，新鲜的自体骨具有生物活性，不存在免疫排异，无传染疾病的风险，同时存在骨传导和骨诱导能力。

内固定物更换得坚持以下原则，原钢板内固定者，可更换成交锁髓内针或更长的钢板置于张力侧。原交锁髓内针内固定者，可选用更大号髓内针或钢板内固定。原先短钢板内固定者，可改成较长的钢板。所有病例均需植骨。更换内固定物后，术后石膏外固定者，应及早进行肌肉收缩锻炼活动，骨痂生长良好后，去石膏开始关节屈伸功能锻炼。但是临床上医师应该具体问题具体对待，可以根据骨痂生长情况酌情处理，出院时务必详细医嘱病人注意事项，配合医生，直到骨折完全愈合。LCP钢板内固定适用于四肢长骨骨折不愈合，可用拉力螺钉固定碎骨块及移植骨块，并对断端行轴向加压锁定。手术关键是将骨折端的瘢痕结缔组织全部切除，骨端硬化骨全部咬除，露出正常骨质，钻通髓腔，植入的骨块必须牢固的嵌入缺损区，间隙用松质骨填满，。应积极正确指导术后功能锻炼，严格定期随访及指导。避免过早的不正确的负重。综上所述，对于骨折不愈合的治疗，自体骨移植疗效确切，安全稳妥，技术成熟，应用广泛，值得提倡。

三、课题研究的主要内容

（一）临床资料

病例来源：本研究病例均采集于山东中医药大学附属医院骨科病房。

（二）采集时间

9年5月~1年1月。

（三）病例选择

1、诊断标准

（1）病史：明确的外伤史，骨折后6个月没有愈合，并且没有进一步愈合倾向已有3个月。

（2）症状：患者骨折端成角、旋转、侧移位、短缩畸形或者节段性骨缺损、持重疼痛或不能持重、局部在应力下疼痛等。

（3）体征：局部窦道形成、流脓、假关节形成或伴有局部软组织瘢痕、缺损等。

（4）辅助检查：X线表现：骨端硬化，髓腔封闭。骨端萎缩疏松，中间存在较大的间隙。或骨端硬化，相互成为杵臼假关节等这三种形式中的任何一种就可以定为骨折不愈合。

2、纳入病例标准：

（1）符合本病诊断标准。

（2）骨折平均愈合时间超过半年以上，有假关节形成。

（3）骨折平均愈合时间超过半年以上，多次复查X线拍片显示，骨折线清晰可见，未见内外骨痂或内外骨痂极少。

（4）拍片显示骨折线增宽，骨折端骨面致密性硬化，骨髓腔封闭，骨质疏松，骨痂间无骨小梁形成，或伴有明显的骨缺损。

（5）临床表现有骨的感染、缺损、畸形、肢体不等长、局部窦道形成、流脓等。

3、排除病例标准：

（1）不符合上述诊断标准者。

（2）患者有严重的内科疾病，不能够耐受手术者。

（3）精神疾病患者。

（4）资料不全影响判断者。

4、疗效观察方法

对骨不连愈合的评价应包括骨愈合和功能恢复双重评价：

（1）骨愈合评价标准：本评价结果决定于四项指标：骨愈合、感染、畸形和肢体长度，其中骨愈合标准为X线示骨折线模糊，有连续骨痴通过骨折线，拆除或试行松动外固定物后骨折无异常活动，下肢可无痛行走，上肢持物骨折处有稳定感。 评价标准：

优：骨折愈合，无感染，断端畸形<°，双侧肢体不等长< CM。

良：骨折愈合及其他三标准中两项。

可：骨折愈合及其他三标准中一项。

差：骨折未愈合或再骨折或虽愈合但不具备其他三标准中任何一个。

（2）功能评价标准：

功能的评价分上肢与下肢的不同，上肢主要考虑其灵活性，而下肢主要功能为负重行走。

将下肢评价指标定为以下五项：

①明显跛行。

②踝或膝任何一关节僵硬（完全伸膝或踝完全背伸时，活动范围较正常或对侧丧失15°以上）。

③软组织情况不良。

④有限制活动或影响睡眠的疼痛存在。

⑤丧失工作能力或生活不能自理。

优：存在工作能力且无其他四项指标。

良：存在工作能力且具以上四指标中一至二项。

可：存在工作能力并具以上指标中三至四项。

差：丧失工作能力或生活不能自理，不考虑是否具备其他指标。

对上肢功能评价参照xxxSeu和Hdlly对上肢功能评价标准xxx[3]。

观察指标为三项：疼痛、关节活动范围、日常活动能力。

（3）上肢功能评价标准。

5、课题进度及安排：

9—5——1—1收集病例及随访。

1—1——1—1资料汇总及数据分析。

11—1——11—3撰写论文、定稿。

四、本课题特色、预期取得的结果

骨折不愈合应用自体骨移植治疗效果显着已经形成共识，治疗过程中的经验总结需要不断的进行，更要求开展回顾性工作及进行系统的整理。因此，骨折不愈合的临床资料分析就显得尤为重要。

本课题通过搜集整理山东中医药大学附属医院骨科9至1年期间的患者临床资料，对于自体骨移植治疗骨折不愈合的相关性问题进行临床研究与总结。应用统计分析评分进行术前、术后及相关方面比较，对自体骨移植治疗骨折不愈合的临床疗效获得客观、真实、准确的评价，并进一步指导临床工作。

五、可行性分析

山东中医药大学附属医院骨科是山东省中医管理局评定的重点学科、重点科室，在省内知名度较高，病人来源广泛。导师王明喜主任医师从事临床工作3余年，具有丰富的临床经验，对治疗骨折不愈合做过大量研究、临床工作，并取得了良好的效果。本课题搜集整理山东中医药大学附属医院骨科近几年的临床资料，并在导师指导下对这些一手资料进行研究与总结。

四肢长骨骨折不愈合由于并发症较多，治愈比较困难，手术后功能恢复过程漫长，因此在治疗过程中，经验的总结是非常必需的，也是可行的。本课题主要研究山东省中医院近年应用钢丝环扎36°植骨配合LCP内固定治疗四肢长骨骨折不愈合的治疗效果分析情况，因此在选题上可行性较强。课题的研究也得到了学校、附院等各部门、科室的大力支持。相信可以圆满地完成课题。

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